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OT-2移液工作站搭载热振荡模块,助力三种 ELISA 流程实现自动化

2024-02-02     来源:本站     点击次数:1545

酶免疫分析(EIA)或酶联免疫吸附测定(ELISA)是液体样本中检测目标分子(例如抗原)的常用分析工具,通常用于免疫诊断或研究。该测定一般采用 96 孔板格式,其工作流程通常包括试剂转移和混合,以及一些在恒定温度下的孵育和洗涤步骤。这些步骤均要求样本处理具备高度一致性。为了实现自动化,有研究人员使用 OT-2 自动化移液工作站搭配热振荡模块,开发和测试了三种 ELISA 全自动化方案,包括 Takara Bio 的人纤维连接蛋白(FN)夹心 EIA,Tecan 的唾液皮质醇竞争 ELISA,以及 Cell Sciences 的中和 SARS-CoV-2 抗体竞争 ELISA。
 
实验简介:
酶联免疫吸附测定(ELISA)是一种通过高度特异的抗体-抗原的相互作用对液体样本的目标分子(例如抗原)进行检测和定量的技术。这种测定通常在 96 孔或 384 孔板上进行,其提供用于固定抗原的固体表面,一般通过将抗原直接连接到固体表面或通过使用预涂在固体表面上的捕获抗体来实现。通过该过程,它能够将抗原与样本中其他非靶标分子分离开来。
 
ELISA 的常规操作步骤包括试剂转移、孵育以及重复洗涤,这些步骤可以在 OT-2 上轻松实现自动化。在每个实验步骤之间会进行连续的洗涤,以去除未结合的分子。为了防止剩余的试剂被带到下一个实验步骤中,把残留的液体全部吸走显得尤为重要。Opentrons 的 8 通道移液器可进行高效、精准的移液处理,以充分满足 ELISA 中试剂转移和洗涤的需求。此外,还可以通过添加 Opentrons 温控模块或热振荡模块,以提升自动化水平和满足实验中样本孵育环节所需的恒温功能(例如设定 37℃ 以促进抗原-抗体相互作用)。
 
方案亮点:
1、配备 8 通道移液器和热振荡模块的 OT-2 移液工作站,具备高精度自动化完成 ELISA 的能力。
2、在更高通量设置中,该方案可以在最短的动手时间内处理多达 96 个样本。
 
部分方案图片:
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通过使用 OT-2 进行三种 ELISA 检测,作者得出结论:

1、在 OT-2 上进行的稀释处理和吸光度测量显示出高度一致的结果,证实了 OT-2 液体处理的精确性和可重复性。
2、根据厂家说明书的要求,该对照组的 OD450 值都在有效范围内,验证了实验的有效性。
3、通过比较抑制率(确定样本中是否存在中和抗体),成功检测到先前被诊断为 SARS-CoV-2 抗体阳性的样本中存在的中和抗体。
 
综上所述,该实验在检测中和抗体方面表现出优越的精确性和可靠性,OT-2 的样品处理能力足以与传统手动操作方法相媲美。
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