外泌体则是一种直径为30~100nm、主要由细胞内多泡体与细胞膜融合并释放到细胞外基质中的膜囊泡,在电镜下表现为脂质双层包裹的扁平球体,呈特征性的杯状外形。许多哺乳动物细胞有释放外泌体的能力,包括网织红细胞、树突状细胞、B细胞、T细胞、肥大细胞、上皮细胞、肿瘤细胞等。在动物细胞中发现外泌体后,越来越多的证据表明在植物中会出现MVB和类似外泌体的囊泡。
图2 植物外泌体
除了动物体液外,许多植物中也发现含蛋白质和小RNA的外泌体样纳米粒子,如生姜、胡萝卜、西瓜葡萄、橄榄、瓜子。这些植物外泌体由于无毒性,有大规模生产的可能性,其内在特性和携带药物或小RNA分子等其他化合物的可能性,在医疗应用中引起了广泛关注。Regente等于2009年首次发现植物中存在外泌体样小泡,该小泡在向日葵种子中直径为50~200nm。其后许多研究集中于囊泡及其生物活性成分的深层表征,以更好地了解其内在特性和可能的生物技术应用。本文简述一下植物外泌体与动物外泌体的差异,发现植物外泌体在某些领域具有独特的优势,使其在某些方面超越了动物外泌体。
01 来源与生成机制的差异
根据目前的研究,植物外泌体的生物发生有三种可能的途径(图3):外囊阳性细胞器(EXPO)途径、多泡体(MVBs)途径和液泡途径。其中,MVBs途径被认为是PELNs形成的主要途径。基本过程包括质膜向内出芽以形成早期内体,这些内体成熟并与反式高尔基体网络通信,形成MVBs。MVBs内的腔内囊泡(ILV)可以包含各种物质,如RNA、DNA、脂质等。MVBs与质膜融合后,ILV可释放到细胞外间隙,形成PELNs。该途径与已知的哺乳动物来源外泌体(MDEs)的生物发生途径高度相似。EXPO途径涉及形成类似于自噬体的双膜结构,它可以与质膜融合,向细胞壁释放单膜囊泡。液泡途径主要发生在植物防御真菌病原体期间。感染后,液泡与质膜融合并释放其水解酶和防御蛋白的内容以抵消病原体的入侵。它们在植物的生长、发育和应对外界环境变化的过程中逐渐形成和释放。植物细胞的细胞壁结构和复杂的胞内环境赋予了植物外泌体独特的生成条件。
02 成分与结构的独特性
由动物外泌体的形成过程可以看出,动物外泌体的内含物在MVE的形成时期就已经初步确定。蛋白是动物外泌体内含物中的一大类物质,其含量与种类相当丰富。动物外泌体包含的蛋白可分为两类:一类是在外泌体普遍表达并可作为标记物用来识别外泌体的蛋白,包括热休克蛋白、TSGl01、Alix、Foltillin、Rab蛋白等膜转运和膜融合蛋白以及四跨膜超家族(tetraspanin)的成员CD9、CD63、CD81蛋白分子;另一类是不同来源、不同环境外泌体各自拥有的特异性蛋白,如T细胞来源的外泌体可携带CD3分子,神经元来源的外泌体可表达谷氨酸受体等。除蛋白以外,外泌体包含的另一大类重要物质就是核酸,包括DNA、mRNA、微小RNA、lncRNA等。外泌体所携带的核酸、蛋白等分子赋予外泌体丰富的生物学信息,通过外泌体传输到其他细胞发挥特定的生物学效应(图5)。
动物外泌体的成分也包括脂质、蛋白质和核酸等,但相对植物外泌体,其成分的多样性和独特性略显不足。植物外泌体的结构通常更加稳定,由于其细胞壁的存在,植物外泌体在外界环境中的稳定性更高,能够更好地保护其内部的生物活性成分。
03 生物活性与功能优势
1. 强大的抗氧化能力04 安全性与可持续性
1. 低免疫原性05 应用前景的广阔性
1. 美容护肤领域06 展望与未来
相较于动物源外泌体,植物外泌体在保有类似结构和功能的同时,原料来源更广,也更容易放大和工业化。考虑化妆品法规风险,那植物外泌体就更具潜力。从功效角度,未来将挖掘出植物外泌体在皮肤护理领域的更多作用,其在皮肤外用中的有效性也将进一步得到考察和验证;从新原料角度,源自于不同植物,尤其是中国特色植物的外泌体有望踏上新原料风口。另外,作为载体结构,植物外泌体也可以改变化妆品市场上脂质体为主的现状。既可以负载多种稳定性不佳、刺激性强、溶解性不佳的常规活性物,也可以负载目前非常火热的核苷酸、蛋白质、功能脂质等新成分。
当然,植物外泌体同样也会面临一些挑战。虽说植物外泌体的提取工艺较之动物源外泌体更易实现和转化,但总的来说依然比较耗时耗力。同样,植物外泌体的质量标准和控制依然有待建立。另外,外泌体在皮肤外用上的研究依然较为局限,尤其是临床研究更为稀少。除了有效性的验证外,明确的内在机理和作用途径也有待进一步研究和阐述。
随着研究的不断深入和技术的不断进步,植物外泌体有望在医疗、美容、保健等领域发挥更加重要的作用,为人类的健康和美丽带来更多的福祉。我们有理由相信,植物外泌体这一自然的馈赠,将引领未来生命科学的发展潮流,创造更多的奇迹和可能。
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