AOPI荧光染色法：细胞活率分析的标准化解决方案
2025-06-09 来源:本站 点击次数:68
关于AOPI荧光染色法
AOPI荧光染色原理
AOPI试剂由AO（Acridine Orange，吖啶橙）和PI（Propidium iodide，碘化丙啶）组成。其中，AO是一种异染性荧光阳离子染料，可渗透细胞膜，并嵌入所有细胞（活细胞和死细胞）的细胞核，检测到绿色荧光。PI不能通过完整的细胞膜，只能进入死细胞的细胞膜，并嵌入死细胞的细胞核，检测到红色荧光。当AO、PI试剂均存在于细胞中，在合适的染料配比下，染料间会发生荧光共振能量转移，致活细胞被激发出绿色荧光，死细胞被激发出红色荧光。
使用CytScop系列智能细胞计数仪经AOPI染色后获得的代表性细胞图像
传统操作步骤
AOPI荧光染色法标准化的基石：微流控+AI模型
CytScop®Pro智能细胞计数仪通过微流控芯片全自动染色混匀、AI算法自动识别分析样品，无需手动移液、染色、混匀、上样、细胞活率分析等操作，实现全自动标准化细胞样品活率分析，消除主观因素对检测结果的影响。检测完成一个样品后，自动清洗，确保样品之间的检测一致性，提高结果的可靠性和重复性。
自动染色&混匀：AOPI染料集成于芯片流道，细胞悬液注入后自动溶解混合，消除人工配液误差；专利的微米级通道设计使得样品混匀过程保持样品的完整性；使得仪器液路系统更加精简，用户在日常操作中所需给设备清洁和维护工作量大幅降低。
双荧光+明场大视野光学系统成像
CytScop的光学专利技术利用细胞与其周围水介质之间的微小折射率差异来增强细胞与其类似的透明溶液中产生高效的对比度。这种技术方法在明场模式下，能够突出细胞的外观形态和局部特征均能产生明显的差异，具有非常好的立体感和极佳的细节表现能力。系统在暗场荧光下，系统能够收集更多的荧光信号，从而增强不同波长的荧光特异性。
CytScop®的AI模型能够更科学地识别细胞凋亡/团簇团聚等复杂情况；模型运行时，不再需要人为设置各种参数阈值如直径、亮度、圆度、系数等，对不同的细胞类型/生物工艺具有良好的可拓展性与更准确的泛化能力，使得分析结果更加准确。
综上所述，基于AOPI荧光染色法并结合CytScop®细胞计数仪的自动化分析，为细胞治疗产品的细胞活率分析提供了一个高精度、标准化的解决方案。通过完全自动化操作生成的客观、可量化、可追溯数据，为GMP合规性提供了坚实保障；其强大的细胞类型兼容性，使其能有效适应不同来源、形态各异的复杂细胞样本，覆盖从中间过程控制及工艺评估等关键工艺步骤；同时，微流控技术的创新应用显著降低的样本消耗量，使其对自体细胞等珍贵的治疗性细胞样本尤为友好，为细胞产品研发和生产提供更加准确、高效、便捷的细胞计数和分析解决方案。