Cytation多技术联用解锁T细胞活化研究新方案
2025-10-28 来源:安捷伦科技 点击次数:64
在免疫治疗和细胞疗法快速发展的当下，精准量化 T 细胞活化与增殖成为科研核心需求。传统铬释放实验不仅放射性风险高，还难以提供全面的细胞功能信息。今天就为大家介绍一种更高效的研究方案——结合成像、发光和 ELISA 技术的多参数评估方法，搭配安捷伦专业设备，轻松破解 T 细胞研究难题！
一、为什么要重新定义T细胞活化研究？
T 细胞是适应性免疫的核心，其活化状态直接反映免疫功能，对免疫治疗开发至关重要。但传统方法存在明显局限：
二、多技术联用方案：3种方法互补，覆盖T细胞研究全维度
研究团队采用“细胞成像+发光检测+ELISA”三技术联用策略，分别从细胞形态、代谢活性、细胞因子分泌三个核心维度，实现 T 细胞活化的精准量化，具体方案如下：
1. 细胞增殖评估（细胞成像+发光检测双验证）
实验设计
将 EpCAM 特异性 CAR-T 细胞接种到安捷伦 96 孔黑边透明底板（PN 204626-100），加入不同浓度 IL-2 培养 5 天；
2. 细胞激活-细胞因子分泌分析（ELISA 精准定量）
实验设计
将人淋巴细胞分为两组（CD3/CD28 激活组 vs 未激活组），均加入 10ng/mL IL-2 培养 5 天，每日收集上清，用 ELISA 检测 IFN-γ 和 TNF-α 浓度；
关键结果
（1）激活组 24 小时内 IFN-γ 浓度即达 2000pg/mL 以上，3 天后稳定在 5000pg/mL 左右（图 5）；
（2）TNF-α 分泌趋势相似，激活组浓度最高达 8000pg/mL 以上（图 6）；
（3）未激活组 5 天内几乎检测不到这两种细胞因子，且两组细胞增殖速率无差异（图 7），排除细胞数量对细胞因子浓度的干扰。
三、Cytation细胞成像检测分析系统：让多参数研究更高效、更可靠
Cytation 系列细胞成像检测分析系统正是这套多技术联用方案高效研究的核心工具，其优势可总结为 3 点：
1. 一站式满足多技术需求
Cytation 系列（Cytation 1/5/7/C10）兼具成像和多模式酶标检测功能，无需在不同设备间转移样本：
3. 数据可靠，结果可重复
安捷伦细胞分析平台包括xCELLigence RTCA实时细胞分析仪、NovoCyte系列流式细胞仪、Seahorse能量代谢分析仪以及Synergy系列微孔板检测仪和Cytation 系列（共聚焦）细胞成像多功能微孔板检测仪。安捷伦细胞分析平台聚焦基础科研与细胞与基因治疗产品的开发全流程，作为适配新一代疗法的强大分析工具，提供多方位的细胞效力检测和深度的细胞分析，并致力于研发、生产质控以及临床的全方位检测与分析方案开发。
一、为什么要重新定义T细胞活化研究？
T 细胞是适应性免疫的核心，其活化状态直接反映免疫功能，对免疫治疗开发至关重要。但传统方法存在明显局限：
- 放射性风险：如铬释放实验需使用放射性材料，安全性低；
- 信息单一：仅能评估细胞杀伤等部分功能，无法全面呈现细胞动态；
- 通量不足：难以适配现代高通量实验需求。
二、多技术联用方案：3种方法互补，覆盖T细胞研究全维度
研究团队采用“细胞成像+发光检测+ELISA”三技术联用策略，分别从细胞形态、代谢活性、细胞因子分泌三个核心维度，实现 T 细胞活化的精准量化，具体方案如下：
1. 细胞增殖评估（细胞成像+发光检测双验证）
实验设计
将 EpCAM 特异性 CAR-T 细胞接种到安捷伦 96 孔黑边透明底板（PN 204626-100），加入不同浓度 IL-2 培养 5 天；
- 通过成像技术直接观察细胞形态并计数，获取细胞数量变化；
- 取部分细胞转移至白色微孔板，用 CellTiter-Glo 发光法检测细胞活力。
关键结果
（1）当与 100ng/mL 的 IL-2 孵育五天后，CAR T 细胞的数量增加（成像计数）（图 3）；
（2）100ng/mL IL-2 处理组的 CAR-T 细胞活力（发光信号）显著高于无 IL-2 组（p≤0.0001），且 IL-2 在测试浓度范围内（0.1-100ng/mL）均能有效激活细胞活力（图 3 和图 4）；
（3）发光法比单纯细胞计数更灵敏，能更早捕捉 T 细胞活化的代谢变化。
（1）当与 100ng/mL 的 IL-2 孵育五天后，CAR T 细胞的数量增加（成像计数）（图 3）；
（2）100ng/mL IL-2 处理组的 CAR-T 细胞活力（发光信号）显著高于无 IL-2 组（p≤0.0001），且 IL-2 在测试浓度范围内（0.1-100ng/mL）均能有效激活细胞活力（图 3 和图 4）；
（3）发光法比单纯细胞计数更灵敏，能更早捕捉 T 细胞活化的代谢变化。
2. 细胞激活-细胞因子分泌分析（ELISA 精准定量）
实验设计
将人淋巴细胞分为两组（CD3/CD28 激活组 vs 未激活组），均加入 10ng/mL IL-2 培养 5 天，每日收集上清，用 ELISA 检测 IFN-γ 和 TNF-α 浓度；
关键结果
（1）激活组 24 小时内 IFN-γ 浓度即达 2000pg/mL 以上，3 天后稳定在 5000pg/mL 左右（图 5）；
（2）TNF-α 分泌趋势相似，激活组浓度最高达 8000pg/mL 以上（图 6）；
（3）未激活组 5 天内几乎检测不到这两种细胞因子，且两组细胞增殖速率无差异（图 7），排除细胞数量对细胞因子浓度的干扰。
三、Cytation细胞成像检测分析系统：让多参数研究更高效、更可靠
Cytation 系列细胞成像检测分析系统正是这套多技术联用方案高效研究的核心工具，其优势可总结为 3 点：
1. 一站式满足多技术需求
Cytation 系列（Cytation 1/5/7/C10）兼具成像和多模式酶标检测功能，无需在不同设备间转移样本：
- 成像模块：支持明场、荧光成像及分析，可直接观察细胞形态、计数，捕捉 T 细胞活化的形态学变化；
- 酶标模块：兼容吸收光，荧光，发光等多种检测模式，一次实验获取细胞活力、细胞因子浓度等多维度数据。
2. 适配高通量与活细胞研究
- 兼容 6-1536 孔板，满足高通量药物筛选的实验需求；
- 与 BioSpa 自动细胞培养箱联用，实现多达 8 块孔板活细胞长期动态监测，可实时追踪 T 细胞在培养过程中的增殖、活化变化，避免样本处理带来的误差。
3. 数据可靠，结果可重复
- 设备性能稳定，成像分辨率高、酶标检测灵敏度强（如发光法可精准区分低浓度 IL-2 的激活效应）；
- 适配标准化实验流程，数据重复性好，为免疫治疗研发、药物筛选等提供可靠支持。
结合成像、发光和基于 ELISA 的检测，Cytation 为研究人员提供了一个强大高效、适应性强的工具，多维度量化 T 细胞活化过程。
如果你正在从事免疫相关研究，想要突破传统实验的局限，不妨试试安捷伦这套“成像+发光+ELISA”的多参数方案，让 Cytation 和 BioSpa 系统成为你的科研助力！
相关产品：
Cytation 5 细胞成像多功能微孔板检测系统
Cytation C10 共聚焦微孔板成像检测系统
关于安捷伦细胞分析
如果你正在从事免疫相关研究，想要突破传统实验的局限，不妨试试安捷伦这套“成像+发光+ELISA”的多参数方案，让 Cytation 和 BioSpa 系统成为你的科研助力！
相关产品：
Cytation 5 细胞成像多功能微孔板检测系统
Cytation C10 共聚焦微孔板成像检测系统
关于安捷伦细胞分析
安捷伦细胞分析平台包括xCELLigence RTCA实时细胞分析仪、NovoCyte系列流式细胞仪、Seahorse能量代谢分析仪以及Synergy系列微孔板检测仪和Cytation 系列（共聚焦）细胞成像多功能微孔板检测仪。安捷伦细胞分析平台聚焦基础科研与细胞与基因治疗产品的开发全流程，作为适配新一代疗法的强大分析工具，提供多方位的细胞效力检测和深度的细胞分析，并致力于研发、生产质控以及临床的全方位检测与分析方案开发。
相关文章
更多 >