引言
qPCR是一种融合了PCR扩增与荧光检测技术的高灵敏度方法，能够对样品中的DNA或cDNA进行精确定量。该技术已广泛应用于基因表达分析、微生物与病原体检测，以及NGS建库中的文库定量等多个科研与诊断领域。

qPCR技术拥有极宽的动态检测范围，其定量依赖于通过系列稀释阳性对照建立Ct值与对数浓度的标准曲线。然而，逐级稀释对移液误差极为敏感：即便每步误差仅2%–3%，累积后也可能导致最低浓度点的显著偏离，甚至使标准曲线失效。因此，高质量的qPCR质控必须采用高精密度和准确度的移液设备或自动化工作站。

本文展示了来自英国SPT Labtech 公司的多功能液体工作站apricot DC1的液体处理性能，并验证其在qPCR实验体系构建中的适用性。该工作站的核心优势在于实现了全自动的qPCR实验流程：从精准分装qPCR试剂盒中的单个试剂，到自动完成标准曲线的制作、样品梯度稀释和PCR反应体系配置的整个流程。

材料与方法
液体处理
本文展示的主要液体处理步骤均在SPT Labtech公司的apricot DC1自动化液体处理工作站上完成。该工作站是一款紧凑型台式设备，其核心配置与特点如下：

• 多功能移液系统：配备独特的4合1移液头与双分配核心，支持1/8/12通道，并可自动更换枪头，量程范围： 0.5–1000 µL。

• 灵活的工作台面：提供纵向与横向两种布局选择，可分别容纳最多9个和7个台面器件，便于集成多种实验模块。

• 高耗材兼容性：广泛兼容SBS标准规格的24、96、384孔板（包括深孔板与PCR板），以及1.5/2.0/5.0 mL微量离心管、PCR管与试剂槽等实验室常用耗材。

• 模块化扩展功能：支持选配温控模块、振荡器与磁力架等多种功能模块，以满足复杂的实验需求。

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qPCR实验体系配置
本次qPCR实验采用 TaqMan™ 基因表达预混试剂（Applied Biosystems, Cat. 4369016），以浓度为 108 ng/mL 的阳性病毒对照作为起始样本，在 apricot DC1 自动化液体处理工作站上，于 96 孔 U 底板中完成阳性对照的连续梯度稀释。每个稀释度设 3 个复孔。具体操作流程如下：

1. 使用 8 通道 125 μL 量程吸头，向梯度稀释中间板的第 2–8 列每孔加入 90 μL 稀释缓冲液；

2. 向同一板的第 1 列加入 20 μL 阳性对照；

3. 使用 8 通道，从第 1 列吸取 10 μL 阳性对照转移至第 2 列，与 90 μL 稀释缓冲液混合，完成第一次 1:10 稀释；

4. 依次对第 3–8 列继续进行 10 倍梯度稀释，每次混匀体积为 70 μL，混匀次数为 10 次，确保均匀混合。

随后，使用 SPT Labtech 的 dragonfly discovery 分液器，向 qPCR 检测板（Applied Biosystems, Cat. 4306737）的第 1–8 列每孔加入 9 μL qPCR 预混试剂。将该板置于 apricot DC1 工作台面上，由 DC1 自动从梯度稀释板中吸取 1 μL 样品，转移至 qPCR 检测板对应孔中。

具体实验流程与台面布局见下图figure 1

qPCR检测板使用封板膜（Applied Biosystems, 4311971）密封后，置于QuantStudio 6 Flex qPCR仪（Applied Biosystems, 4485697）上进行检测。所用程序如下：95°C 10分钟；随后进行40个循环的95°C 15秒退火/延伸。检测完成后，将获得的Ct值相对于阳性对照浓度的对数值绘制散点图，并拟合线性回归模型，以确定该标准曲线的斜率与R²值。

结论
实验结果表明，配备独特4合1移液头的apricot DC1是实现准确梯度稀释的理想平台。该设备支持自动更换吸头，有效避免了样品在连续稀释过程中的残留风险。此外，apricot DC1具备多达9个扩展台面，并可在1、8或12通道模式间灵活切换，既能处理单一样品分装，也能高效完成多列连续梯度稀释及后续qPCR反应体系的构建。综上所述，apricot DC1为建立自动化qPCR工作流程提供了一个功能灵活、操作简便且经济高效的整体解决方案。

DC1视频全解析
https://v.douyin.com/TywL1yu83wg