牙周炎是由多种微生物与宿主免疫反应引起的牙周支持组织的慢性炎症。牙龈上皮细胞借助模式识别受体（pattern recognition receptors, PRRs）识别包含核心致病菌牙龈卟啉单胞菌等口腔病原体，构成了抵御感染的首要屏障。而最为关键的Toll 样受体（Toll-like receptors, TLRs，TLR4 ）可感知病原体相关分子模式（pathogen-associated molecular patterns, PAMPs），包括脂多糖（lipopolysaccharides, LPS）和脂蛋白等。TLR4激活后会触发下游信号通路（尤其是 NF-κB 通路），促进IL-1β、IL-6 和 TNF-α 等促炎细胞因子的产生。这些细胞因子随后放大炎症级联反应，加剧牙周组织损伤。

枯草芽孢杆菌是一种革兰氏阳性杆状细菌，能形成具有高度抵抗力的芽孢，耐受极端高温、干燥及其他不利环境条件，可在胃酸、胆汁丰富的胃肠道以及复杂的口腔微生物生态系统等恶劣环境中存活。该菌可通过产生枯草菌素等多种抗菌肽发挥有益作用，具有抑制牙周致病菌生长的潜力。

在此前小鼠模型的研究中发现，枯草芽孢杆菌 R0179可通过分泌含有中康酸的上清液，抑制牙龈卟啉单胞菌生长及生物膜的形成与成熟，进而抑制该菌诱导的实验性牙周炎。因此，需要阐明热灭活枯草芽孢杆菌 R0179 是否通过 TLR 信号通路调控牙周炎症，为牙周炎的预防和管理提供理论支持。

文章题目为“Inactivated Bacillus subtilis R0179 Inhibits Porphyromonas GingivalisInduced Gingival Inflammation Via TLR2/NF-κB Signaling in a Murine Model of Periodontitis”于2025年8月发表在Inflammation杂志，作者来自北京大学口腔预防学系国家口腔临床研究中心。

研究人员为了评估牙龈卟啉单胞菌穿透牙龈上皮细胞的能力，将该菌与牙龈上皮细胞共培养2小时后收集样本，进行透射电子显微镜观察。与对照组（C组）相比，牙龈卟啉单胞菌感染组（C+Pg 组）中，牙龈卟啉单胞菌可侵入牙龈上皮细胞的细胞质，并被吞噬体包裹形成吞噬小泡（图1A中箭头所示）。随后使用qPCR（定量聚合酶链反应）和Western blot（蛋白质印迹法）检测牙龈卟啉单胞菌刺激后牙龈上皮细胞中TLR（Toll 样受体）的水平变化。

结果表明，与对照组（MOI=0 的牙龈卟啉单胞菌刺激组）相比，MOI=50 的牙龈卟啉单胞菌可显著提高细胞中 TLR4 的蛋白和 mRNA水平。而牙龈卟啉单胞菌的刺激，是否会诱导牙龈上皮细胞中其他 TLR 的表达变化。研究人员以 MOI=50 的牙龈卟啉单胞菌刺激上皮细胞12小时发现，牙龈卟啉单胞菌刺激可上调 TLR1、TLR2、TLR4、TLR6 及磷酸化 NF-κB（p-NF-κB）的表达，并促进促炎细胞因子的释放。为验证牙龈卟啉单胞菌刺激后促炎细胞因子的变化，研究人员通过细胞因子芯片检测 IL-1β、IL-6 和 TNF-α 的表达，使用法国Innopsys激光共聚焦荧光扫描仪进行荧光信号检测及分析。结果显示，牙龈卟啉单胞菌刺激可诱导上皮细胞中 IL-1β、IL-6 和 TNF-α 的表达上调，该结果也验证了qPCR 实验中观察到的细胞因子 mRNA 表达趋势（如图1）。

为探究枯草芽孢杆菌 R0179 是否能逆转牙龈卟啉单胞菌刺激诱导的 TLR、下游 p-NF-κB 及促炎细胞因子表达变化，研究人员通过 Western blot、qPCR 和抗体芯片实验进行了验证。与单独牙龈卟啉单胞菌感染组（Pg组）相比，枯草芽孢杆菌 R0179（MOI=50）共刺激组显著降低了TLR2、TLR4 及 p-NF-κB 的蛋白水平，但对 TLR1 和 TLR6 的蛋白水平无显著影响。qPCR 结果显示，枯草芽孢杆菌 R0179 处理可下调牙龈卟啉单胞菌诱导的TLR2、TLR4、IL-1β、IL-6 及 TNF-α 的 mRNA 水平，对 TLR1 和 TLR6 的 mRNA 水平无显著影响。此外，枯草芽孢杆菌 R0179 还能下调牙龈卟啉单胞菌刺激的牙龈上皮细胞分泌 IL-1β、IL-6 及 TNF-α 的水平。荧光芯片检测结果进一步验证了 qPCR 实验中观察到的细胞因子 mRNA 表达变化趋势（图2）。

为验证枯草芽孢杆菌 R0179 在体内调控牙龈卟啉单胞菌诱导炎症的机制，研究人员开展了体内实验。对上颌组织的苏木精 - 伊红（H&E）染色结果显示，牙龈卟啉单胞菌刺激会加重牙龈炎症，而枯草芽孢杆菌 R0179 处理可减轻该菌诱导的牙龈炎症程度。与对照组（C 组）相比，牙龈卟啉单胞菌刺激组（C+Pg 组）中 TLR2、TLR4、p-NF-κB、IL-6、IL-1β 及 TNF-α 的表达升高；而枯草芽孢杆菌 R0179 处理组（C+Pg+B.subtilis 组）可抑制牙龈卟啉单胞菌诱导的 TLR2、TLR4、p-NF-κB、IL-6、IL-1β 及 TNF-α 的表达。此外，TLR2 受体激动剂处理可拮抗枯草芽孢杆菌 R0179 的作用，提高 p-NF-κB、IL-6、IL-1β 及 TNF-α 的表达，而 TLR4 受体激动剂处理无显著影响。

本研究探讨了枯草芽孢杆菌 R0179 对牙龈卟啉单胞菌诱导炎症反应的调控作用，系统评估了牙龈卟啉单胞菌和枯草芽孢杆菌 R0179 处理后，牙龈上皮细胞中 Toll 样受体（TLRs）、磷酸化 NF-κB（p-NF-κB）及下游促炎细胞因子表达的变化。研究结果不仅证实了牙龈卟啉单胞菌在牙周炎发病过程中诱导牙龈炎症的作用，还揭示了枯草芽孢杆菌 R0179 可能通过抑制 TLR2/NF-κB 通路，减轻牙龈卟啉单胞菌诱导的炎症反应。这些发现揭示，热灭活枯草芽孢杆菌 R0179 有望成为牙周炎管理中的一种潜在辅助治疗手段。

原文链接：https://doi.org/10.1007/s10753-025-02348-8

Innopsys 成立于1999年。总部位于法国，一直致力于生物医学领域相关仪器和软件的自主研发和生产。Innoscan系列扫描仪，采用先进的共聚焦PMT检测器和多激光扫描光路，可以同时进行多通道荧光检测。不仅有效降低了荧光光漂白现象以及信号损失，还可以有效缩短扫描时间。在基因组和蛋白组表达，基因突变，SNP检测，CGH，细菌病毒检测，肿瘤特异性标志筛查，病理组织筛查等方面都有非常广泛的应用。

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