文章背景与研究目的
乳腺癌现状:乳腺癌是全球女性最常见癌症及癌症相关死亡主因,尽管诊疗进步提高生存率,但仍需探索新治疗策略及预后标志物。
外泌体的作用:外泌体(纳米级囊泡)通过运输细胞因子等生物活性分子,调控肿瘤微环境,促进乳腺癌转移(如上皮 - 间质转化、血管生成、免疫抑制)。
标志物意义:
CD133:癌干细胞标志物,调控致癌信号通路,与结直肠癌、肝癌等转移 / 复发相关;
CD105:血管生成介导因子,在肿瘤微环境中高表达,是潜在治疗靶点。
研究目的:明确 MDA-MB-231 细胞外泌体中 CD133 和 CD105 的表达特征,探究其对乳腺癌细胞信号通路(如 AKT/ERK)及迁移能力的影响,为乳腺癌发病机制及治疗提供依据。
实验流程图
活细胞成像仪Celloger Mini Plus在细胞迁移实验方案
- MDA-MB-231/MCF-7 细胞(2×10⁵个 / 孔)与不同外泌体共培养于 24 孔板;
- P200 枪头划痕,更换无血清培养基;
- Celloger Mini Plus 活细胞成像系统(5× 放大)在 0h、24h、48h 拍照记录。
统计分析:数据以mean±SD表示,两组比较用A two-tailed t-test,多组比较用one-way analysis of variance (ANOVA),p<0.05 为差异有统计学意义。
细胞与外泌体共培养后的迁移实验
迁移实验证明,与 CD133 - 外泌体共培养的 MDA-MB-231 细胞相比,20h 观察期内CD133 + 外泌体共培养组细胞迁移能力显著增强。
活细胞成像仪Celloger Mini Plus与外泌体研究中的应用场景
细胞迁移实验
- Celloger Mini Plus 可进行长时程划痕实验连续成像;
- 计算划痕闭合率、迁移速率精准评估外泌体的促迁移作用;
细胞增殖与凋亡监测
- Celloger Mini Plus 支持无损实时拍摄,长期跟踪细胞数目变化;
- 结合荧光模块(如 AO/PI),自动分析细胞存活比例和凋亡趋势;
细胞形态学变化观察
- Celloger Mini Plus 高分辨率明场/荧光成像,清晰记录外泌体作用下细胞的伸展、融合、形态重塑;
- 自带分析功能,减少人工干预,提高统计客观性;
信号通路功能验证
- Celloger Mini Plus 可在特定荧光标记下动态追踪外泌体介导的信号通路;
- 多孔板拍摄功能,支持平行实验与对照组比较;
类器官/3D 培养体系
- Celloger Mini Plus 可兼容大体积凝胶与类器官培养体系;
- 实时观察外泌体在组织修复或抗肿瘤模型中的效果;
实验结论
1、本研究首次证实 MDA-MB-231 乳腺癌细胞来源的外泌体中高表达的CD133可通过激活AKT/ERK 信号通路,促进乳腺癌细胞存活、迁移,参与肿瘤进展;
2、外泌体作为肿瘤微环境中的 “信号传递者”,其产生或与受体细胞的相互作用可作为乳腺癌治疗的潜在靶点;
3、需进一步研究外泌体摄取机制、不同亚型外泌体的功能差异及临床转化价值(如作为预后标志物或治疗干预靶点)。
参考文献
1、Songjang W, Promchai S, Nensat C, Adulyaritthikul P, Boonkoom T, Seetasang S, Jiraviriyakul A. Unveiling the impact of CD133 and CD105 in MDA-MB-231 cell-derived exosomes on breast cancer cell signaling pathways. Cell Mol Biol (Noisy-le-grand). 2025 Apr 26;71(4):94-99. doi: 10.14715/cmb/2025.71.4.12. PMID: 40285779.