AAV在心脏的注射方式有多种,心肌原点注射、冠状动脉注射、颈静脉注射和尾静脉注射均可以将药物递送到心脏,通常文献报道较多的是心肌原点注射和尾静脉注射。
心肌注射:
心肌注射是通过注射器或类似装置将药物直接注入心脏组织,多采用原位多点注射方式,注射体积20μL/site,3-5点注射,通常注射的总病毒量在10E11VG以上。与血管注射相比,心肌直接注射方法特异性较强,可以实现对感兴趣区域的高效转导,但表达不均匀,只在注射部位周围的区域进行表达。
心肌注射(心外膜与心内膜途径)与心包注射
尾静脉注射:
是将小鼠固定后通过尾部侧面的静脉注射使药物传递到心脏。尾静脉注射易于操作,但是特异性较心肌注射稍弱,注射体积在100μL-200μL左右,由于载体在全身广泛分布,注射剂在血容量中会被稀释,所以通常需要较高的病毒滴度。
颈静脉注射:
颈静脉注射时,在麻醉小鼠颈部做切口,并分离颈静脉,用31G针将载体注入颈静脉。此方法需要进行手术,操作要求较高,且对动物有伤害性。颈静脉注射时,所注射的病毒总量约为20μL-100uL。
冠状动脉注射:
冠状动脉注射又分顺行冠状动脉注射和逆行冠状动脉注射。
顺行冠状动脉注射是通过导管直接注射载体,允许具有心脏选择性的载体进行微创递送,由于其微创性该方法具有较大的优势,已广泛用于临床和实验基因治疗研究。但由于内皮细胞是载体到达心肌细胞的屏障,导致转导效率相对较低,可以小剂量的持续注入或使用一些药剂(如腺苷、组胺类、硝酸甘油等)来增加血管床的渗透性进行改善。
顺行冠状动脉注射
逆行冠状动脉注射是通过阻断冠状窦进行压力调节的逆向输注,相比顺行注射更加有效。然而,这种方法需要暂时中断冠状动脉血流,以消除顺行血流对压力的影响。虽然转导效率很高,但创伤较大,危险性较高。

通过冠状窦逆行注射
几种常用注射方式的优劣势比较
