第一步：使用前的准备与测试
这是决定成败的关键，切忌直接用于珍贵细胞。
1. 验收与检查：收到血清后，立即检查内外包装有无破损、渗漏。血清应为冰冻或冰水混合状态，若已完全融化，需联系供应商。

第二步：正式更换与过渡
预实验通过后，才对主培养细胞进行更换，并采用梯度过渡法。
1. 操作示例：在配制完全培养基时，按旧血清:新血清=7:3 → 5:5 → 3:7的体积比例，分步过渡，每一步稳定培养1-2代细胞。最后一步再完全使用新血清。

第三步：更换后的处理
1. 记录：记录新血清的品牌、批号、启用日期以及更换后细胞的各项数据，便于日后追溯。
2. 保存：将分装好的血清妥善保存于-20℃或更低温度，避免反复冻融。融化后若在4℃保存，建议不超过1个月。

其他关键注意事项：
更换和使用过程中，常会遇到几个问题：
1. 血清中出现沉淀：解冻后出现少量絮状或颗粒沉淀（显微镜下可能为“小黑点”），通常是纤维蛋白或脂蛋白析出，属于常见物理现象。只要按照上述正确方法解冻，可减少沉淀产生。少量沉淀一般不影响使用，若想去除，可进行400-600g离心5分钟，取上清，不建议直接过滤血清以免堵塞滤膜。