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小鼠单核巨噬细胞RAW264.7的汇合度实时分析实验

2026-06-15     来源:本站     点击次数:20

RAW264.7是科研领域家喻户晓的小鼠单核巨噬细胞系,凭借性状稳定、可塑性强、实验门槛低的优势,成为免疫学、炎症生物学、骨代谢与药物毒理研究的标杆细胞模型。相较于分离难度大、存活条件苛刻、无法长期传代的原代巨噬细胞,RAW264.7具备无限增殖的能力,且细胞表型稳定、性状稳定。

01核心科研价值
炎症相关研究中,利用LPS刺激即可快速构建稳定的体外炎症模型,重复性高、成本低廉,适合大批量抗炎药物筛选与通路机制验证。

在肿瘤微环境研究中,该细胞可模拟肿瘤相关巨噬细胞的浸润与调控作用,助力肿瘤免疫机制探索。

同时,它也是纳米材料、生物制剂、天然产物的毒性与免疫安全性评价的核心载体,能够精准反馈外源物质对机体免疫平衡的影响

02标准化培养体系
1. 培养基配制:
基础配方:89% 高糖DMEM + 10% 胎牛血清 (FBS) + 1% 双抗。

2. 培养环境
温度与气体:37℃,5% CO₂,相对湿度95%。

03实操攻略与技术要点
1. 复苏
速融:37℃水浴1-2分钟迅速解冻,注意震荡以加速溶解。
去DMSO:转移至离心管,1000 rpm离心5分钟,弃上清以彻底去除DMSO。

接种:使用新鲜培养基重悬并接种,接种后24小时内严禁晃动培养箱,确保细胞充分贴壁。

2. 传代
该细胞最大的特点是半悬浮半贴壁状态,和普通贴壁细胞不同,严禁胰酶消化。

常规传代无需胰酶处理,借助培养基温和吹打即可脱落,一旦消化过度,会造成细胞破损、活性骤降,影响后续实验。同时该细胞对培养密度异常敏感,汇合度一旦超过85%,细胞会堆叠聚集、自发活化,产生本底炎症升高的问题,严重干扰实验数据,因此必须严控传代频率,始终保持RAW264.7细胞疏密均匀的生长状态。

04 MCS31下的RAW264.7
明美活细胞扫描分析仪MCS31实现了对活细胞培养以及研究过程中的可视化与量化追踪。
对48h长期观察下的RAW264.7进行扫描观察以及汇合度结果分析:

扫描分析图

数据导出图


关于明美MCS31活细胞扫描分析仪
实现细胞增殖、细胞迁移、荧光转染等细胞实验的全过程监测与实时分析,适配于细胞培养、共培养、类器官构建与观察、药物筛选等多种研究场景,让动态实验数据化、结果可视化,为细胞生物学、药理学等领域的研究提供高效可靠的成像解决方案。

 

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