《细胞探险队》旅程更新!开启细胞培养的奇妙之旅:覆盖上百种细胞系,积累干货经验和技巧,让细胞培养不再难!往期细胞探险队请查看合集,囊括:T淋巴细胞系、B淋巴细胞系、单核-巨噬细胞系、NK细胞系、成纤维细胞系、肿瘤细胞系(造血与淋巴组织肿瘤、胃癌、结肠癌、肝癌、肺癌、乳腺癌、神经肿瘤、胰腺癌,卵巢癌,胶质母细胞瘤)
A375
1、名称:A375(人恶性黑色素瘤细胞)
2、别称:A 375、A375-MEL、A375-mel、A375mel、375
3、简介:A-375分离自罹患黑色素瘤的54岁女性的皮肤组织,A-375细胞本身带有BRAF Val600Glu突变,是NRAS突变型A375同源细胞系的理想对照。可用于细胞3D培养,高通量筛选,毒理学和免疫肿瘤学研究。
4、种属:人
5、组织来源:皮肤
6、生长特性:贴壁生长
7、应用:合适的转染宿主,3D培养,毒理学和免疫肿瘤学的重要模型
8、细胞形态:上皮细胞样,长梭形

图片来源于ATCC
9、培养条件:
(1)完全培养基配方:DMEM高糖(SH30243.01)+10% FBS(SV30208.02)
(2)温度:37°C;
(3)气相:5% CO2
10、换液频率:2~3天一次
11、传代周期:2-3天
12、传代比例:1:3-1:8
13、冻存液配方:95%完全培养基+5%DMSO(abs9187-100mL)或商品化细胞冻存液(130-129-552)
14、注意事项:
(1)作为高转移性肿瘤细胞,在不同培养条件下(如血清批次、密度)形态易变;
(2)细胞贴壁较弱,避免过度消化;
(3)低密度下,细胞会失去增殖信号,传代不要过稀。
A2058
1、名称:A2058(人黑色素瘤细胞)
2、别称:A-2058、A 2058
3、简介:A2058分离自患有黑色素瘤的43岁男性患者的皮肤与淋巴结转移病灶。具有极强的迁移和侵袭能力,用于研究黑色素瘤侵袭、转移及潜在治疗靶点。
4、种属:人
5、组织来源:皮肤,淋巴结转移部位
6、生长特性:贴壁细胞
7、应用:肿瘤基础生物学机制研究、抗肿瘤药物筛选与药理研究
8、细胞形态:上皮细胞样,不规则梭形

图片来源于中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库
9、培养条件:
(1)完全培养基配方:DMEM高糖(SH30243.01)+10% FBS(SV30208.02)
(2)温度:37°C
(3)CO2:5%CO2
10、换液频率:2-3次/周
11、传代周期:2-3天
12、传代比例:1:3-1:5
13、冻存液配方:95%完全培养基+5%DMSO(abs9187-100mL)或商品化细胞冻存液(130-129-552)
14、注意事项:
(1)用于药效、侵袭实验必须使用低代次细胞(≤20代);
(2)汇合度70~80%即可传代,长满易大量漂浮死亡。
SK-MEL-28
1、名称:SK-MEL-28(人皮肤黑色素瘤细胞)
2、别称:SK-Mel-28、SK.MEL.28、SK-MEL 28、SKMel-28、SKMEL-28、SK-MEL28、SKMEL28、SK28、SKML-28、AU-Mel、P-36、P36
3、简介:SK-MEL-28分离自患有恶性黑色素瘤的51岁男性患者的皮肤组织中,是合适的转染宿主,被广泛用于黑色素瘤和相关毒理学研究。
4、种属:人
5、组织来源:皮肤
6、生长特性:贴壁细胞
7、应用:合适的转染宿主,3D细胞培养,高通量筛选,毒理学研究
8、细胞形态:上皮细胞样,多边形

图片来源于中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库
9、培养条件:
(1)完全培养基配方:MEM(SH30265.01)+10%FBS(SV30208.02)
(2)温度:37°C
(3)CO2:5%CO2
10、换液频率:1~2天一次
11、传代周期:2-4天
12、传代比例:1:2-1:4
13、冻存液配方:95%完全培养基+5%DMSO(abs9187-100mL)或商品化细胞冻存液(130-129-552)
14、注意事项:
(1)贴壁时间较久,铺板后延长静置时间
(2)细胞较难消化,适当延长消化时间
B16
1、名称:B16(小鼠黑色素瘤细胞)
2、别称:B-16、B16melanoma、B16sublineB78、B78
3、简介:B16源于C57BL/6J小鼠黑色素瘤,可以产生黑色素,同基因小鼠体内移植可成瘤,用于研究癌细胞在身体各个器官中扩散和建立的机制。B16细胞有不同的子系,每个细胞都有自己独特的特性。
4、种属:小鼠
5、组织来源:皮肤
6、生长特性:贴壁细胞
7、应用:3D细胞培养,肿瘤机制研究,药物开发及免疫治疗
8、细胞形态:纺锤形和上皮样混合型态

图片来源于中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库
9、培养条件:
(1)完全培养基配方:RPMI-1640(SH30027.01)+10%FBS(SV30208.02)或DMEM高糖(SH30243.01)+10% FBS(SV30208.02)
(2)温度:37°C
(3)CO2:5%CO2
10、换液频率:2-3次/周
11、传代周期:3-4天
12、传代比例:1:4-1:8
13、冻存液配方:95%完全培养基+5%DMSO(abs9187-100mL)或商品化细胞冻存液(130-129-552)
14、注意事项:
(1)日常扩增和传代,使用RPMI-1640培养基;黑色素分泌相关实验使用DMEM高糖培养基;
(2)B16细胞在体外培养时会产生黑色素,培养基颜色变深为正常现象。RPMI-1640培养基黑色素少,DMEM培养基黑色素多;
(3)贴壁牢固,适当延长消化时间并多次吹打。
参考资料:
ATCC官网
中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库