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基于CytoFLEX mosaic 88的32色光谱流式细胞分析方案

2025-07-28     来源:贝克曼库尔特     点击次数:388

这项研究的背景是什么?
贝克曼库尔特生命科学与美国麻省理工学院、哈佛大学博德研究所、Luminous Bioanalytical Consulting联合开发了一套基于CytoFLEX mosaic的32色光谱流式细胞分析方案,用于人B细胞亚群的深度免疫表型分析。
该方案覆盖B细胞的活化、分化及功能相关标志物,并整合了髓系细胞亚群和慢性淋巴细胞白血病(CLL)相关的免疫标志物,能够绘制完整的免疫图谱。
 
实验使用了哪些样本?
  • 冷冻保存的PBMC(外周血单个核细胞)
  • 健康供体的骨髓样本
实验验证显示,该方法适用于临床样本的回顾性分析,可从有限样本中获取高维免疫信息,对转化医学研究具有实际应用价值。

该方案使用了什么平台?
  • 所有实验在CytoFLEX mosaic 88光谱检测模块上完成。
  • 该模块是CytoFLEX系列最新产品,专为高参数光谱分析而设计,搭载紫外激光器,支持灵活配置。
  • 结合双栖光学路径与双算法分析引擎,提升多色实验的精度与稳定性。
实验流程概览(高亮步骤)
1. 样本复苏与细胞处理
  • PBMC快速复苏,离心清洗,使用Cellaca+AOPI染色计数并调整浓度。
  • 分装入流式管准备染色。
2. 抗体染色流程
  • 进行活性染色、Fc受体封闭、单核细胞阻断。
  • 使用抗IgG抗体及混合抗体孵育并过滤待上机。
3. 设定对照与数据采集
  • 配置单色对照、未染色对照及活性对照。
  • 在mosaic 88模块进行数据采集与分析。
抗体组合和检测结果有哪些亮点?
  • 32种抗体组合覆盖关键免疫亚群(表详见附件)。
  • 荧光扩散矩阵(SSM)显示良好的信号分离性。
  • 设门逻辑清晰,能够精准区分B细胞不同亚群。
实验结果图示

图1:荧光溢出扩散矩阵(SSM)——展示染料之间的光谱重叠情况。

图2:细胞设门策略——展示免疫亚群的区分逻辑与分布。
 
这项方案的优势是什么?
  • 可在样本量受限的情况下实现高维单细胞免疫图谱构建。
  • 适用于基础免疫研究、疾病免疫监测及临床转化研究。
  • 基于CytoFLEX mosaic 88的出色光谱分辨能力,提升了高通量流式分析的实用性。
 
结论总结
本研究展示了基于CytoFLEX mosaic的32色光谱流式检测方案的强大性能。其在B细胞高维分析中的应用证明了其在科研和临床领域的广泛潜力。
 
“双擎驱动,洞见多维” —— CytoFLEX mosaic结合高灵敏度检测模块与智能分析软件,助力光谱流式技术突破传统,开启更高维度的单细胞免疫探索新时代。
 
如需获取抗体组合表或原始实验模板,请联系贝克曼库尔特生命科学团队。
 
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