AAV血清型的选择
在肝脏中应用较多的有AAV2、AAV5、AAV8、AAV9及AAV-DJ等血清型，研究表明AAV8、AAV9和AAV-DJ对肝脏均具有较强的亲嗜性，其中AAV8嗜肝性更强，用于活体动物注射表现为免疫原性低，感染效率高，AAV-DJ的体内肝细胞转导效率与AAV8相近，且在体外实验中也能表现出较强的感染效率。
研究者还可根据实验目的及动物模型的不同选择不同的血清型，其中AAV7、AAV8对小鼠肝脏感染具有较好效果；而在人体肝脏中AAV2、AAV5和AAV8亲和性较强。
如下图所示：无论是选用门静脉还是尾静脉注射，AAV8均能有较高的肝脏转导水平。

启动子的选择
在肝脏中，广谱型启动子CMV即可高效表达，也可以选择肝脏特异启动子增强组织靶向性，如ALB、TBG和ApoEHCR-hAAT，其中TBG应用较多。

客户案例
文章标题：Hepatocyte Apolipoprotein J Accelerates Injury-induced Liver Fibrosis by Activation Signal Transducer and Activator of Transcription 3 Through Ranbp2 Mediated-SUMOylation
发表期刊：Cellular and Molecular Gastroenterology and Hepatology，IF 7.4
合作客户：广西医科大学第一附属医院段双迪团队
维真助力：AAV
基因信息：ApoJ f，载脂蛋白J
病毒产品：AAV8-TBG-control、AAV8-TBG-ApoJ f
实验动物：8周龄C57BL/6J小鼠
注射方式：尾静脉注射
注射量：2*1011GC/只

研究背景
信号转导子和转录激活子3（STAT3）信号通路的失调与氧化还原稳态密切相关，并加剧肝损伤。载脂蛋白J（ApoJ）是一种对氧化还原变化敏感的伴侣，ApoJ如何调节STAT3通路尚不清楚。本研究证明ApoJ在加速肝纤维化进展中起着关键作用，ApoJ/STAT3/RanBP2轴的治疗策略可能为预防和治疗纤维化肝病提供一种新方法。
部分结果展示
1. 腺相关病毒介导的ApoJ过表达增强肝纤维化
作者发现纤维化肝组织中肝细胞ApoJ表达升高，肝细胞特异性ApoJ缺乏能缓解小鼠模型的肝纤维化。为阐明ApoJ在肝纤维化进展中的作用，作者通过AAV8- TBG-ApoJ建立了肝脏ApoJ过表达模型，随后将小鼠暴露于CCl4、TAA或MCD饮食，发现ApoJ的过表达导致ALT和AST的血清水平显著升高、胶原沉积和纤维化增强、HSC活化和巨噬细胞浸润增加，以及促纤维化和炎症基因表达的显著上调。此外ApoJ过表达与MDA水平升高和GSH和SOD水平降低有关，表明抗氧化能力受损。这些数据共同表明，AAV8介导的肝脏中ApoJ的过表达加剧了小鼠模型中损伤诱导的纤维化过程。机制研究发现ApoJ促进RanBP2介导的STAT3 SUMO化，从而促进STAT3激活。

2. STAT3 抑制剂在CCl4诱导的肝纤维化治疗中的作用
为了探索肝纤维化的潜在治疗干预措施，作者研究了STAT3强效抑制剂Stattic对CCl4诱导的肝纤维化的影响，发现Stattic显著改善了ApoJ过表达小鼠的肝损伤。此外，ApoJ肝过表达小鼠的Stattic治疗显著减少了肝胶原沉积和aSMA表达，并改善了肝功能。这些发现共同表明，抑制ApoJ/STAT3轴可以减轻肝纤维化的发病机制。重要的是，Stattic还显示出在逆转或改善已确立的肝纤维化方面的治疗潜力，表明其疗效超出了预防应用。这些结果强调了Stattic在预防和治疗肝纤维化方面的双重作用。

实验结论
本研究证明载脂蛋白J通过信号转导子和转录激活子3调节肝细胞和肝星状细胞之间的关键串扰，表明载脂蛋白J是治疗肝纤维化的有前景的靶点，针对ApoJ/STAT3/RanBP2轴的治疗策略可能为预防和治疗纤维化肝病提供一种新方法。