免疫组化与免疫荧光有何不同？
2025-09-29 来源:本站 点击次数:5免疫组化技术和免疫荧光技术都是基于抗原抗体特异性结合的原理，利用标记抗体对细胞或组织中的抗原进行定位或定量的技术。但两种技术在抗体标记方式、显色方式和结果分析等方面不完全相同。
1、抗体标记方式
免疫组化通常使用酶、金属离子、同位素等物质标记抗体，免疫荧光通常使用荧光蛋白标记抗体。
2、抗体显色方式
免疫组化通过化学反应使标记抗体的显色剂显色，从而确定组织或细胞内抗原的位置。例如过氧化物酶是免疫组化常用的抗体标记物，在添加DAB后，过氧化物酶催化DAB产生棕色物质，进而确定抗原的组织定位。
免疫荧光技术使用对应的激发光照射荧光蛋白，根据荧光蛋白的发光部位确定抗原的组织定位。
3、结果分析
免疫组化可用于抗原定量分析，DAB显色后的棕色物质不会褪色，切片观察不会受到时间、地点、观察者变化等影响，其阳性表达的强度和范围在封片之后是比较稳定的。
免疫荧光主要用于抗原定位分析，拍摄环境、显微镜品牌和激发荧光都会影响镜下观察的效果，此外荧光蛋白存在荧光衰减现象，同一组切片在不同时间观察到的荧光效果不同。但通过不同的荧光二抗，能在同一张切片上展示出不同染色效果，可用于研究蛋白分布范围、空间相互关系。
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