胶质母细胞瘤（GBM）中存在 BCLX 前体 mRNA 异常剪接，表现为抗凋亡亚型 Bcl‑xL 高表达、促凋亡亚型 Bcl‑xS 低表达，是驱动放疗抵抗与肿瘤复发的关键机制。本研究依托普锐斯X‑RAD 225 OptiMAX 光学图像引导X射线辐照仪构建标准化放疗模型，证实 X 射线会进一步促进 Bcl‑xL 优势剪接，加剧肿瘤放射抵抗；使用剪接转换寡核苷酸 Bclx‑vMO 可重编程 BCLX 剪接模式、逆转 Bcl‑xL/Bcl‑xS 比值，同时激活凋亡与自噬通路，显著增敏 2D/3D 胶质瘤细胞对放疗的反应，且对正常胶质细胞无明显毒性。该研究为胶质母细胞瘤精准放疗提供全新靶点与安全高效的联合策略。

图1：论文封面概要

选用 A172、U87 等胶质母细胞瘤细胞系及正常星形胶质细胞 HA1800；构建 Bclx‑vMO 剪接转换寡核苷酸转染体系。采用 RT‑PCR、Western blot 检测 BCLX 剪接亚型表达；通过 MTT、流式细胞术、免疫荧光、克隆形成实验及 3D 肿瘤球模型，系统评估细胞增殖、凋亡、自噬水平及放疗敏感性；结合 TCGA/CGGA 数据库分析 Bcl‑xL 表达与患者预后的相关性。

采用普锐斯 X‑RAD 225 OptiMAX 光学图像引导X射线辐照仪，X 射线参数为 225.0 kV、剂量率 500 cGy/min。体外细胞给予 0–6 Gy 梯度照射，体内模型采用临床模拟分割照射方案，用于研究 BCLX 剪接转换对放疗敏感性的调控作用。

图 2：（原文 Fig.6A） X 射线辐照调控 BCLX 剪接亚型表达

1. BCLX 异常剪接是 GBM 放疗抵抗的核心标志

Bcl‑xL 在 GBM 中显著高表达，并与患者不良预后密切相关；X 射线辐照可进一步上调 Bcl‑xL/Bcl‑xS 比值，强化放疗抵抗表型。

2. Bclx‑vMO 实现安全高效的剪接重编程

Bclx‑vMO 可定向将剪接产物转向促凋亡的 Bcl‑xS，抑制肿瘤细胞增殖、激活 caspase 凋亡通路并增强自噬流，对正常细胞无毒性。

3. 联合放疗实现强效协同抑瘤

Bclx‑vMO 联合 X 射线放疗可显著降低克隆形成率、增加细胞凋亡、缩小 3D 肿瘤球体积，实现显著放疗增敏效应。

图 3：（原文 Fig.7D） Bclx-vMO 联合放疗对 GBM 细胞克隆存活的抑制曲线

基于普锐斯X‑RAD 225 X射线辐照仪精准辐照模型证实，BCLX 前体 mRNA 异常剪接是胶质母细胞瘤放疗抵抗的关键分子机制。Bclx‑vMO 介导的剪接重编程可特异性杀伤肿瘤细胞、高效增敏放疗，且具备良好生物安全性。靶向 BCLX 剪接联合放疗是一项极具临床转化价值的胶质母细胞瘤新型治疗策略。

图 4：（原文 Fig.8）适配结论，模式图阐明 BCLX 剪接调控凋亡与放疗增敏机制

原文出处DOI：10.1038/s41419-024-06507-x