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胃肠间充质工具鼠Foxl1-2A-CreERT2小鼠的介绍及常见问题解答

2026-08-14     来源:南模生物     点击次数:21

研究上皮的时候,包在它外面的那层间充质常常缺一个操作入口
肠道生物学的常用工具鼠,多数把重组酶交给上皮:Villin 标记绒毛与隐窝上皮,Lgr5 标记隐窝底部的肠道干细胞,EpCAM 覆盖泛上皮谱系。可上皮并不是孤立工作的——包绕在隐窝-绒毛轴外侧的间充质细胞、平滑肌层,持续向上皮发出信号,参与维持干细胞所在的微环境(niche)。当一个课题想问的不是"上皮细胞里的某基因做了什么",而是"上皮周围的间充质、平滑肌改变后,上皮会怎样",上皮驱动的 Cre 就使不上力,需要的是一款把操作对准间充质一侧的工具。


Foxl1-2A-CreERT2 小鼠(目录号 NM-KI-00135)提供的正是这样一个入口。它以叉头框转录因子基因 Foxl1(forkhead box L1)的表达谱驱动他莫昔芬(tamoxifen)诱导型 Cre 重组酶(CreERT2),把"在哪些细胞里发生重组"落到胃肠道的间充质细胞与小肠平滑肌细胞,把"何时重组"交给给药时间。

Foxl1 的表达落点:胃肠间充质、小肠平滑肌,以及肝损伤时的卵圆细胞
按产品数据库记录,Foxl1 的表达集中在胃和肠的间充质细胞中,标记细胞为小肠平滑肌细胞;此外,在肝脏损伤时出现的卵圆细胞(oval cell,一类肝脏祖细胞)中也有表达。这一分布让该品系同时覆盖了两个不同的研究场景:一是稳态下胃肠道上皮外侧的间充质与平滑肌区室,二是损伤诱导后才出现的肝脏祖细胞群。

对工具鼠设计而言,Foxl1 的意义不在于它本身的功能,而在于它划出的这条细胞边界——用它的表达模式驱动重组酶,可以让 Cre 活性尽量贴合胃肠间充质/平滑肌这一目标细胞群,以及肝损伤条件下的卵圆细胞,而不落到相邻的上皮层里去。人源直系同源基因为 FOXL1。

一款间充质/平滑肌驱动的诱导型工具鼠能补上哪些实验设计
把操作对准上皮周围的间充质,而不是上皮本身。 要检验间充质或平滑肌区室对上皮稳态、损伤修复的贡献,需要在这群细胞里单独改变目的基因,同时让上皮保持原样。以 Foxl1 表达谱驱动的 Cre 配合相应的 flox 品系,可把基因改变限定在间充质/平滑肌一侧,再观察上皮的继发反应,从而把"间充质做了什么"与"上皮做了什么"拆开来看。

在成体特定时间点起始重组,绕开发育期的干扰。 不少间充质与平滑肌相关基因在胃肠道发育过程中就已参与形态建成,组成型敲除容易带来先天结构异常,使成年期表型与发育缺陷混在一起。让小鼠正常发育至成年后再给予他莫昔芬诱导,可在既有的间充质/平滑肌细胞中删除或激活目的基因,使结论指向成熟组织本身。

追踪肝损伤时才出现的卵圆细胞命运。 Foxl1 在肝损伤条件下的卵圆细胞中有表达,借助 Cre 依赖的报告基因品系,可在损伤造模并给药后,对当时的 Foxl1 阳性祖细胞打上永久遗传标记,随后观察这批细胞在肝脏再生过程中的去向与分化。这类"损伤诱导才出现的细胞群"用组成型 Cre 难以精准捕捉,时间可控的诱导型更为契合。

从靶点到给药:Foxl1-CreERT2 的可控维度
该品系的靶基因为 Foxl1(别名 fkh6、Fkh6、FREAC7;人源直系同源基因 FOXL1;MGI ID 1347469,NCBI Gene ID 14241,Ensembl ID ENSMUSG00000097084)。参考表达组织为胃肠道,参考标记细胞为小肠平滑肌细胞。毛色黑色,当前为精子冻存供应,目录号 NM-KI-00135。

CreERT2 是与雌激素受体配体结合域(estrogen receptor ligand-binding domain)融合的 Cre 重组酶:未给药时滞留于胞质、无重组活性;给予他莫昔芬后,其代谢产物 4-羟基他莫昔芬(4-OHT)与受体结合,使融合蛋白入核、识别 loxP 位点并催化重组。诱导型的价值就在这里——重组的时间由给药决定。具体给药剂量、次数与途径可延伸阅读《Tamoxifen 诱导 Cre-ERT2 小鼠使用指南》

作为工具鼠,该品系本身不携带疾病相关突变,需与携带 loxP 侧翼(floxed)等位基因的品系或 Cre 依赖的报告基因品系交配后使用;单独饲养不产生可供表型分析的改变。

验证要回答的问题:给药后重组是否落在预期的细胞类型
一款诱导型 Cre 工具鼠是否可用,取决于两点是否同时成立——重组活性是否被约束在设计预期的细胞类型上,以及是否确实受给药控制。通行的验证逻辑是:与报告基因品系交配,对子代给予他莫昔芬后检测报告信号;若信号定位于胃肠道的间充质/平滑肌细胞、且未给药对照无明显本底重组,说明活性既受细胞类型约束、又受给药诱导控制。南模生物为该品系提供 Cre 活性验证数据,研究者可在选型阶段结合官方验证资料,确认标记的组织与细胞类型是否契合课题;若需要特定日龄、特定诱导方案下的更细化数据,可进一步索取品系资料或咨询。

图 .CreERT2-mediated recombination in small intestine of Foxl1CreERT2/+; Rosa26tdTomato/+ mice.

常见问题(FAQ)
Foxl1-2A-CreERT2 的 Cre 活性出现在哪些细胞? 该品系以内源 Foxl1 的表达模式驱动 CreERT2,按产品记录,表达集中在胃和肠的间充质细胞,参考标记细胞为小肠平滑肌细胞,并在肝损伤时的卵圆细胞中有表达。具体范围可结合官方 Cre 活性验证资料确认。

它是组成型还是诱导型?需要怎么给药? 为他莫昔芬诱导型(CreERT2)。给予他莫昔芬或 4-OHT 后重组酶入核发挥活性,重组时间由给药时间决定。成年小鼠的常用剂量、给药次数与途径可参考诱导型 Cre 使用指南,或就具体方案向南模生物咨询。

想研究肠道间充质对上皮的作用,用它合适吗? 这类研究需要在上皮之外的间充质/平滑肌区室单独改变目的基因,Foxl1-2A-CreERT2 提供的正是这一操作前提。它本身是工具鼠,不自带表型,需与相应的 flox 品系、报告基因品系组合使用,若涉及损伤修复还需配合造模手段。

能不能同时区分上皮和间充质两侧的作用? 可让 Foxl1-2A-CreERT2 与上皮驱动品系并行,例如 Vil1-CreERT2(NM-KI-225020)或 Lgr5-EGFP-IRES-CreERT2(NM-KI-200154),在同一 flox 背景下分别诱导,比较表型归属。 订购与咨询(阅读原文

Foxl1-2A-CreERT2 小鼠,目录号 NM-KI-00135,精子冻存供应;同类可选 Pdgfra-CreERT2(NM-KI-225036)、Gli1-CreERT2(NM-KI-200073)、Vil1-CreERT2(NM-KI-225020)、Lgr5-EGFP-IRES-CreERT2(NM-KI-200154)、Tagln-CreERT2(NM-KI-225006)等胃肠道与间充质/平滑肌相关工具鼠。咨询电话 400-728-0660,或在线咨询。

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