膳食纤维的测定及RINTDF法的优势
2025-01-09 来源:本站 点击次数:363
当前用于测量膳食纤维的分析方法
A. 总膳食纤维方法
B. 个体膳食纤维成分方法
C. 补充膳食纤维方法 - 较少使用
RINTDF方法（AOAC 2017.16和AOAC 2022.01）相较于综合TDF方法（AOAC 2009.01）的优势
为了克服集成TDF方法报告的所有局限性，调整后创建了RINTDF方法。RINTDF在2016年接受了实验室间评估，并在2018年被接受为AOAC方法2017.16，在2022年被接受为AOAC方法2022.01。
较短的孵育时间：在整合的总膳食纤维（TDF）方法中，与胰α-淀粉酶（PAA）和淀粉葡萄糖苷酶（AMG）的孵育时间为16小时，与已发表的测量抗性淀粉（RS）的方法一致。然而，食物在小肠中的停留时间更可能是约4小时，这是在快速整合总膳食纤维（RINTDF）中使用的时间。为了获得与AOAC方法2009.01在16小时内对一系列对照淀粉/抗性淀粉的水解程度相同，RINTDF方法中PAA和AMG的水平需要大幅增加（PAA从2 KU/检测增加到5 KU/检测，AMG从0.14 KU/检测增加到1.7 KU/检测）。
避免RMD伪影：已有报告在使用整合TDF方法水解某些淀粉时会产生少量的抗性麦芽糊精。这些寡糖在分析方法中对进一步水解具有抗性，但容易被小肠粘膜的α-葡萄糖苷酶复合体水解——因此它们是由分析方法产生的伪影，不应包括在膳食纤维（DF）中。在RINTDF采用的修订孵育条件下，水解淀粉时不会形成有问题的抗性麦芽糊精。
提高RS4的准确性：整合TDF方法的结果显示对磷酸交联淀粉（Resistance Starch 4，RS4）有些低估。虽然使用RINTDF获得的结果与使用整合TDF方法获得的结果非常相似，但对于某些磷酸交联淀粉样品（如Fibersym®）和天然高直链玉米淀粉（例如Hylon VII®），获得了更高（更具生理相关性）的值。
提高FOS的准确性：使用整合TDF方法时，当使用所选的HPLC系统（Waters Sugar-Pak®柱）时，低聚果糖（FOS）也被低估，因为果糖三糖与二糖共洗脱，因此无法测量。为了实现果糖三糖（在FOS中）与二糖的完全分离，改用Tosoh Biosciences LLC的TSKgel G2500PWxL®凝胶渗透柱进行HPLC（如Matsutani Chemical Company推荐的），而不是使用Waters Corporation的Sugar-Pak®柱。使用甘油作为内标物代替山梨醇，因为在TSKgel G2500PWxL®柱上，山梨醇与葡萄糖共洗脱。这导致需要从酶制剂中排除甘油，这已在快速整合总膳食纤维检测试剂盒（K-RINTDF）中实现。
更安全的配方：K-INTDF在孵育缓冲液中使用了叠氮钠以防止16小时孵育期间的微生物污染。鉴于叠氮钠具有显著的毒性，这是不可取的。由于RINTDF使用的孵育时间较短，孵育溶液的微生物感染不是问题，这意味着可以从孵育缓冲液中排除叠氮钠。
A. 总膳食纤维方法
| AOAC 方法 | 测量成分 | 货号 |
| 2022.01 | HMWDF和SDFS IDF、SDFP及SDFS | K-RINTDF |
| 2017.16 | HMWDF与SDFS IDF、SDFP和SDFS | K-RINTDF |
| 2009.01 | 所有食物中的HMWDF和SDFS | K-INTDF |
| 2011.25 | 所有食物中的IDF、SDFP和SDFS | K-INTDF |
| 985.29 | HMWDF | K-TDFR |
| 991.43 | IDF和SDFP分别 | K-TDFR |
B. 个体膳食纤维成分方法
| AOAC 方法 | 测量成分 | 货号 |
| 995.16 | 谷物、饲料和食品中的（1-3）（1-4）-β-葡聚糖 | K-BGLU |
| 997.08 | 果聚糖和低聚果糖（FOS） | K-FRUC |
| 999.03 | 果聚糖和低聚果糖（FOS） | K-FRUC |
| 2000.11 | 聚葡萄糖 | |
| 2001.22 | 反式低聚半乳糖（GOS） | |
| 2002.02 | 抗性淀粉（RS2 和 RS3） | K-RSTAR |
C. 补充膳食纤维方法 - 较少使用
| AOAC 方法 | 测量成分 | 货号 |
| 991.42 | 食品中的IDF | K-TDFR |
| 993.19 | 食品中的SDFP | K-TDFR |
| 993.21 | 样本中纤维含量大于10%且淀粉含量小于2%的总高分子量溶解性固体（HMWDF） | |
| 994.13 | HMWDF；提供糖组成和Klason木质素 | |
| 2001.03 | 不含抗性淀粉的食物中的HMWDF和SDFS |
RINTDF方法（AOAC 2017.16和AOAC 2022.01）相较于综合TDF方法（AOAC 2009.01）的优势
为了克服集成TDF方法报告的所有局限性，调整后创建了RINTDF方法。RINTDF在2016年接受了实验室间评估，并在2018年被接受为AOAC方法2017.16，在2022年被接受为AOAC方法2022.01。
较短的孵育时间：在整合的总膳食纤维（TDF）方法中，与胰α-淀粉酶（PAA）和淀粉葡萄糖苷酶（AMG）的孵育时间为16小时，与已发表的测量抗性淀粉（RS）的方法一致。然而，食物在小肠中的停留时间更可能是约4小时，这是在快速整合总膳食纤维（RINTDF）中使用的时间。为了获得与AOAC方法2009.01在16小时内对一系列对照淀粉/抗性淀粉的水解程度相同，RINTDF方法中PAA和AMG的水平需要大幅增加（PAA从2 KU/检测增加到5 KU/检测，AMG从0.14 KU/检测增加到1.7 KU/检测）。
避免RMD伪影：已有报告在使用整合TDF方法水解某些淀粉时会产生少量的抗性麦芽糊精。这些寡糖在分析方法中对进一步水解具有抗性，但容易被小肠粘膜的α-葡萄糖苷酶复合体水解——因此它们是由分析方法产生的伪影，不应包括在膳食纤维（DF）中。在RINTDF采用的修订孵育条件下，水解淀粉时不会形成有问题的抗性麦芽糊精。
提高RS4的准确性：整合TDF方法的结果显示对磷酸交联淀粉（Resistance Starch 4，RS4）有些低估。虽然使用RINTDF获得的结果与使用整合TDF方法获得的结果非常相似，但对于某些磷酸交联淀粉样品（如Fibersym®）和天然高直链玉米淀粉（例如Hylon VII®），获得了更高（更具生理相关性）的值。
提高FOS的准确性：使用整合TDF方法时，当使用所选的HPLC系统（Waters Sugar-Pak®柱）时，低聚果糖（FOS）也被低估，因为果糖三糖与二糖共洗脱，因此无法测量。为了实现果糖三糖（在FOS中）与二糖的完全分离，改用Tosoh Biosciences LLC的TSKgel G2500PWxL®凝胶渗透柱进行HPLC（如Matsutani Chemical Company推荐的），而不是使用Waters Corporation的Sugar-Pak®柱。使用甘油作为内标物代替山梨醇，因为在TSKgel G2500PWxL®柱上，山梨醇与葡萄糖共洗脱。这导致需要从酶制剂中排除甘油，这已在快速整合总膳食纤维检测试剂盒（K-RINTDF）中实现。
更安全的配方：K-INTDF在孵育缓冲液中使用了叠氮钠以防止16小时孵育期间的微生物污染。鉴于叠氮钠具有显著的毒性，这是不可取的。由于RINTDF使用的孵育时间较短，孵育溶液的微生物感染不是问题，这意味着可以从孵育缓冲液中排除叠氮钠。
相关文章
更多 >