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Pipetty电动移液器在食品双酚类化合物含量测定中的应用

2025-12-11     来源:广州程淇生物     点击次数:65

方案摘要:本方案将 Pipetty Pro 非等量电动移液器应用于食品中双酚 A、F、S 等化合物的含量测定。该仪器通过预设程序精准完成关键试剂的移取,无需反复调整量程,规避人为误差。其日志记录功能可追溯实验参数,微孔板导航功能保障批量样品处理准确性,显著提升前处理效率与结果可靠性。方案适用于肉、乳、谷物、蔬果及饮料等各类食品样本,为双酚类化合物痕量分析提供高效技术支持。
 
方案详情:
一、实验原理
       
试样中的双酚 A,双酚F和双酚 S,用乙腈或甲醇-水溶液提取,免疫亲和柱净化,液相色谱-串联质谱法测定,内标法定量。
 
二、实验准备
1、设配和材料
除微生物实验室常规灭菌及培养设备外,其他设备和材料如下:
① 分光光度计;
② 水蒸气蒸馏装置;
③ 水浴锅:可控温度 100℃±1℃,精度为0.1 ℃;
④ Pipetty Pro非等量电动移液器 MSIC12-01-1000。
 
2、试剂和材料
① 冰乙酸(C2H4O2);
② 乙酰丙酮(C5H8O2);
③ 乙酸铵(C2H7O2N);
④ 磷酸(H3PO4);
⑤ 二甲基硅油;
⑥ 试样:密封保存的啤酒样品(不少于100mL)。
 
三、实验步骤
1、试剂配置
  ① 乙酰丙酮溶液:称取25.0g乙酸铵溶于90mL超纯水中,搅拌至完全溶解;使用Pipetty电动移液器,精准吸取0.4mL乙酰丙酮,缓慢注入上述溶液中;吸取3.0mL冰乙酸注入溶液,搅拌混匀后用超纯水稀释至100mL,转移至棕色试剂瓶中备用。
 
② 磷酸溶液:称取20g磷酸溶于80mL超纯水中,搅拌均匀后稀释至100mL,混匀后备用。
③ 甲醛标准中间液:取10mL容量瓶,加入少量超纯水;使用Pipetty电动移液器吸取1.00mL 1000mg/L甲醛标准溶液,缓慢注入容量瓶中,避免溶液溅壁;用超纯水定容至刻度,混匀后转移至试剂瓶中,标注信息后冷藏保存。
④ 甲醛标准工作液:取100mL容量瓶,加入少量超纯水;使用Pipetty吸取1.0mL 100mg/L甲醛标准中间液注入容量瓶;超纯水定容至刻度,混匀后备用。
⑤ 甲醛系列标准工作液:取7支25mL具塞比色管,依次编号为0-6号;使用PipettyPRO“非等量连续移液”功能,预先在仪器中输入移液体积序列:0mL、0.50mL、1.0mL、2.0mL、4.0mL、8.0mL、10.0mL;从1号管开始,按预设序列依次吸取1.0mg/L甲醛标准工作液注入对应比色管中(0号管不吸液,作为空白),每移液一次后仪器自动切换至下一体积,无需手动调整量程,减少操作误差;向各比色管中加入超纯水至10mL刻度线,混匀后备用。
 
2、试样处理
① 啤酒试样开封后立即摇匀,用中速滤纸过滤去除二氧化碳,收集滤液至洁净烧杯中;取500mL蒸馏瓶,加入20mL磷酸溶液、1mL二甲基硅油及50mL超纯水,备用。
② 吸取25.00mL过滤后的啤酒试样,缓慢注入蒸馏瓶中,连接水蒸气蒸馏装置;预先在250mL接收瓶中加入10mL超纯水,将接收管插入液面下并置于冰浴中,启动蒸馏;
收集馏出液约195mL时停止蒸馏,室温放置30min后转移至200mL容量瓶中,超纯水定容至刻度,混匀;吸取10.0mL上述馏出液注入25mL具塞比色管中。
3、显色与检测
① 使用Pipetty,向装有馏出液的比色管及7支系列标准工作液比色管中各加入1.0mL乙酰丙酮溶液;盖紧比色管塞,充分混匀后置于沸水浴中加热5min,取出后冷却至室温。
② 用水替代啤酒试样,设置空白试验组。
③ 将甲醛系列标准工作液与试样同时同样处理;冷却至室温后,置于1cm 比色皿中,以甲醛标准系列工作液的零点为参比调零,于415 nm 测定吸光度值:以标准系列工作液的浓度为横坐标,以其吸光度值为纵坐标,绘制标准曲线。
④ 将上述所得溶液置于1cm 比色皿中,于 415 nm 测定吸光度值;若样品测得结果超出标准线性范围,则用空自试样溶液稀释后再进行测定。
注:所得样液应在1h内进行测定。
四、数据处理
1、试样样中甲醛的含量按式(1)计算。
 
2、在重复性条件下获得的2次独立测定结果的绝对差值不应超过算术平均值的10%。
3、当取样量为 25.00 m 时,本方法的检出限为 0.4 mg/L,定量限为 1.2 mg/L。
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