• 将新生24h的SD大鼠用75%乙醇浸泡5min，开胸，取出心脏后于含有双抗的预冷过的D-HANKS中漂洗两遍，移入超净台。
• 仔细剪除大血管，左右心房及右心室和室间隔，保留左心室，去除内、外膜，PBS清洗。
• 用眼科剪将心室肌剪碎至约1mm3，滴加1ml胎牛血清，均匀接种于6cm细胞培养皿内，组织块间隔1-2mm，放入5% CO2，37℃恒温培养箱内培养。
• 4小时后去除培养皿，加入3ml含有20%FBS和1%双抗的H-DMEM培养基，继续培养。
• 一般情况下48小时后可见有细胞爬出，换新鲜培养基继续培养。
• 5-7天后有大量细胞铺满皿底，弃去培养基，用PBS清洗一遍，加入2ml胰酶进行消化1分钟左右。
• 吸去胰酶。加入完全培养基终止反应，并用移液器反复吹打。
• 倾斜培养皿稍等片刻，让组织块沉淀后吸去上层细胞悬液，70μm细胞筛过滤后接种至12孔板为后续共培养试验做准备。

     研究中常用的细胞系/株系是现成的，我们只需要进行细胞传代和种子保存。然而，这些细胞系往往因长期体外培养而失去原有的生物学特性，对药物治疗的反应差距越来越大。因此，越来越多的人选择原代细胞。来源于胚胎、组织、器官和外周血，经特殊分离方法制备的原代培养细胞称为原代细胞。原代细胞培养，也称为原代培养，是从供体获得的组织细胞在体外的培养。
上海昆盟生物科技有限公司 (Coweldgen Scientific Co.,LTD) 是一家专注于生命科学领域提供相关试剂产品和服务的生物高科技企业。公司提供种类齐全的细胞系、质量稳定的细胞培养试剂产品、成熟高效的技术服务、专业周到的技术支持。