方案摘要：本方案基于福林-酚法测定蛋白质含量，引入 Pipetty Pro 电动移液器优化实验流程。其核心优势在于非等量移液功能，可精准完成对照品溶液 0.0-1.0mL 梯度体积（0.0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL）的一次性移取，无需反复调整量程，减少操作步骤与误差累积。同时，该移液器精度高、操作稳定，能确保碱性铜试液、福林酚试液等试剂移取的准确性，避免手动移液导致的体积偏差。通过优化移液环节，可缩短实验准备时间 30% 以上，提升标准曲线线性相关性，确保供试品浓度计算的可靠性，尤其适用于批量样品的高效、精准测定。
 
方案详情：
一、实验原理
       依据蛋白质分子中含有的肽键在碱性溶液中与Cu2+螯合形成蛋白质-铜复合物，此复合物使酚试剂的磷钼酸还原，产生蓝色化合物，同时在碱性条件下酚试剂易被蛋白质中酪氨酸、色氨酸、半胱氨酸还原呈蓝色反应。在一定范围内其颜色深浅与蛋白质浓度呈正比，以蛋白质对照品溶液作标准曲线，采用比色法测定供试品中蛋白质的含量。
 
二、‌实验准备
1、设配和材料
① PipettyPro电动移液器；
② 紫外-可见分光光度计；
③ 涡旋振荡器；
④ 容量瓶；
⑤ 分析天平。
 
2、试剂和材料
① 碱性铜试液；
② 福林酚试液；
③ 蛋白质对照品；
④ 超纯水。
 
三、实验步骤
1、使用Pipetty Pro,小程序设置好每次的分液量，精密量取对照品溶液，按以下体积分别加入 6 支具塞试管，编号分别为0-5号：
0 号管：对照品溶液 0.0mL
1 号管：对照品溶液 0.2mL
2 号管：对照品溶液 0.4mL
3 号管：对照品溶液 0.6mL
4 号管：对照品溶液 0.8mL
5 号管：对照品溶液 1.0mL
2、使用Pipetty Pro 非等量分液模式，所有试管均补水至 1.0mL，保证反应体系初始体积一致。
 
3、每支试管中分别加入碱性铜试液 1.0mL，轻轻摇匀后，在室温下放置 10 分钟。
4、向每支试管中快速加入稀释后的福林酚试液 4.0mL（福林贮备液按 1:16 稀释，酸浓度 2mol/L），加入后需立即混匀，避免局部反应不均；随后在室温下放置 30 分钟。
5、打开紫外 - 可见分光光度计，将波长设定为650nm，预热并校准仪器。
6、以0 号空白管为参比，依次测定 1-5 号对照品试管的吸光度，记录数据。
7、以 “对照品溶液浓度” 为横坐标（X 轴）、“对应吸光度” 为纵坐标（Y 轴），使用 Excel 或专业软件计算线性回归方程（格式：Y = aX + b，a 为斜率，b 为截距）。
四、结果判定
1、精密量取适量供试品溶液（建议浓度落在对照品线性范围内），按 “对照品反应步骤” 操作：加水至 1.0mL→加碱性铜试液→室温 10 分钟→加福林酚试液→立即混匀→室温 30 分钟。
2、同样以 0 号管为空白，在 650nm 波长下测定供试品溶液的吸光度（记为 Y 供）。
3、将 Y 供代入线性回归方程，计算出供试品溶液的实际浓度（X 供）。
4、根据供试品溶液的稀释情况，乘以稀释倍数，得到供试品中蛋白质的最终含量。